HEMIJSKO-PREHRAMBENA I TEKSTILNA ŠKOLA
„UROŠ PREDID“
CENTAR ZA OBRAZOVANJE ODRASLIH
ZRENJANIN
VEŽBE IZ BIOHEMIJE
za vanredne učenike
prilagođene programu biohemije za smer prehrambeni tehničar
2009.
1
Biohemija vežbe
Vežba 1
DOBIJANJE KOLOIDA I ZAŠTITNO DEJSTVO KOLOIDA
Dobijanje koloida iz visokodisperznih sistema agregacijom
Ogled br.1
Pribor i hemikalije
epruvete
izvor svetlosti
kartonska kutija sa uskim prorezom
10% rastvor FeCl3
destilovana voda
Postupak rada
U prvu epruvetu sipati rastvor FeCl3, a u drugu destilovane vode. Epruvete
prosvetliti. Zatim epruvetu sa FeCl3 zagrevati, nakon zagrevanja ponovo prosvetliti.
Zabeležiti zapažanja.
Zaključak
Ogled br.2
Pribor i hemikalije
epruvete
izvor svetlosti
kartonska kutija sa uskim prorezom
10% rastvor FeCl3
rastvor kalijum heksacijanoferata(II) K4[Fe(CN)6]
destilovana voda
Postupak rada
U prvu epruvetu sipati rastvor FeCl3, a u drugu rastvor K4[Fe(CN)6], a u
tredu destilovane vode. Sadržaje epruveta prosvetliti. Potom, sva tri rastvora
pomešati i ponovo prosvetliti. Zabeležiti zapažanja.
Zaključak
HPTŠ “Uroš Predić”, Zrenjanin
2
Biohemija vežbe
Dobijanje koloida iz prirodnih koloida
Ogled br.3
Pribor i hemikalije
epruvete
izvor svetlosti
kartonska kutija sa uskim prorezom
skrob
destilovana voda
Postupak rada
U epruvetu sipati 10 cm3 destilovane vode i na vrh kašikice skroba.
Rastvor homogenizovati i prosvetliti. Zabeležiti zapažanja.
Zaključak
Ogled br.4
Pribor i hemikalije
epruvete
izvor svetlosti
kartonska kutija sa uskim prorezom
belance
destilovana voda
Postupak rada
U epruvetu sipati 10 cm3 destilovane vode i malo rastvora belanceta.
Rastvor homogenizovati i prosvetliti. Zabeležiti zapažanja.
Zaključak
HPTŠ “Uroš Predić”, Zrenjanin
3
Biohemija vežbe
Ogled br.5
Pribor i hemikalije
epruvete
izvor svetlosti
kartonska kutija sa uskim prorezom
mleko
destilovana voda
Postupak rada
U epruvetu sipati 8 cm3 destilovane vode i 2 cm3 mleka. Rastvor
homogenizovati i prosvetliti. Zabeležiti zapažanja.
Zaključak
Dobijanje koloida iz grubodisperznih sistema
Ogled br.6
Pribor i hemikalije
epruvete
izvor svetlosti
kartonska kutija sa uskim prorezom
sumpor
destilovana voda
Postupak rada
U epruvetu sipati 10 cm3 destilovane vode i malo sumpora. Rastvor
homogenizovati i prosvetliti. Zabeležiti zapažanja.
Zaključak
HPTŠ “Uroš Predić”, Zrenjanin
4
Biohemija vežbe
Zaštitna dejstva koloida
Ogled br.7
Pribor i hemikalije
plastična posuda
mikser
ulje
destilovana voda
žumance
Postupak rada
U plastičnu posudu odmeriti iste zapremine ulja i vode. Rastvor
homogenizovati pomodu miksera. Nekoliko slededih minuta posmatrati
promenu, a potom sistemu dodati malo žumanceta i sve homogenizovati
mikserom. Zabeležiti zapažanja.
Zaključak
HPTŠ “Uroš Predić”, Zrenjanin
5
Biohemija vežbe
Vežba 2
UTICAJ SPOLJAŠNJIH FAKTORA NA AKTIVNOST ENZIMA
Ogled br.1: Uticaj temperature na aktivnost enzima
Pribor i hemikalije
metalni novčid
mašice
izvor toplote (plamenik)
krompir
vodonik peroksid H2O2
Postupak rada
Odsedi kolut svežeg krompira, zagrejati novčid na plameniku i
pritisnuti ga na sveži odrezak. Sačekati izvesno vreme i potom kanuti rastvor
H2O2 na kolutid krompira. Zabeležiti zapažanja.
Zaključak
Ogled br.2: Uticaj kiselina na aktivnost enzima
Pribor i hemikalije
pipeta
krompir
razblažen rastvor hlorovodonične kiseline HCl
razblažen rastvor sumporne kiseline H2SO4
razblažen rastvor sirdetne kiseline CH3COOH
vodonik peroksid H2O2
Postupak rada
Odsedi tri koluta svežeg krompira i na svaki kolut do polovine pipetom
naneti po jednu kiselinu. Sačekati izvesno vreme i kanuti na svaki kolut po kap
H2O2. Zabeležiti zapažanja.
Zaključak
HPTŠ “Uroš Predić”, Zrenjanin
6
Biohemija vežbe
Ogled br.3: Uticaj baza na aktivnost enzima
Pribor i hemikalije
pipeta
krompir
razblažen rastvor natrijum hidroksida NaOH
razblažen rastvor kalijum hidroksida KOH
razblažen rastvor amonijum hidroksida NH4OH
vodonik peroksid H2O2
Postupak rada
Odsedi tri koluta svežeg krompira i na svaki kolut do polovine pipetom
naneti po jednu bazu. Sačekati izvesno vreme i kanuti na svaki kolut po kap
H2O2. Zabeležiti zapažanja.
Zaključak
Ogled br.4: Uticaj organskih supstanci na aktivnost enzima
Pribor i hemikalije
pipeta
krompir
etanol C2H5OH
fenol C6H5OH
benzen C6H6
vodonik peroksid H2O2
Postupak rada
Odsedi tri koluta svežeg krompira i na svaki kolut do polovine pipetom
naneti po jednu bazu. Sačekati izvesno vreme i kanuti na svaki kolut po kap
H2O2. Zabeležiti zapažanja.
Zaključak
HPTŠ “Uroš Predić”, Zrenjanin
7
Biohemija vežbe
Vežba 3
KVALITATIVNO DOKAZIVANJE UGLJENIH HIDRATA
Ogled br.1: Ispitivanje rastvorljivosti ugljenih hidrata
Pribor i hemikalije
epruvete
rastvor glukoze
rastvor fruktoze
rastvor saharoze
rastvor skroba
etanol
destilovana voda
Postupak rada
Uzeti 4 epruvete i u njih sipati po 1 cm3 svakog od gore navedenih
rastvora ugljenih hidrata. U sve epruvete dodati po 1 cm3 destilovane vode,
promudkati sadržaj svih epruveta i po potrebi zagrejati. Na isti način ispitati
rastvorljivost u etanolu, ali bez zagrevanja. Zabeležiti zapažanja.
Zaključak
Ogled br.2: Reakcija ugljenih hidrata sa Feling- i Tolens-rastvorima
Pribor i hemikalije
epruvete
vodeno kupatilo
izvor toplote
rastvor glukoze
rastvor fruktoze
rastvor saharoze
rastvor skroba
rastvori Feling I i II
Tolens-ov reagens
HPTŠ “Uroš Predić”, Zrenjanin
8
Biohemija vežbe
Postupak rada
Uzeti 4 epruvete i u njih sipati po 1 cm3 svakog od gore navedenih
rastvora ugljenih hidrata. U sve epruvete dodati po 1 cm3 rastvora Feling I i II i
epruvete promudkati. Sadržaj epruveta zagrevati na vodenom kupatilu do
promene boje. Na isti način ispitati dejstvo Tolens-ovog reagensa na naveden
rastvore u druge 4 epruvete. Zabeležiti zapažanja.
Zaključak
Ogled br.3: Dokazivanje glukoze i fruktoze u medu
Pribor i hemikalije
epruveta
čaša
izvor toplote
rastvor meda
rastvori Feling I i II
Postupak rada
Sipati u epruvetu po 1 cm3 rastvora Feling I i II i dodati 1 cm3 rastvora
meda. Sadržaj epruvete zagrevati na vodenom kupatilu do promene boje.
Zabeležiti zapažanja.
Zaključak
HPTŠ “Uroš Predić”, Zrenjanin
9
Biohemija vežbe
Ogled br.4: Dokazivanje glukoze u vodu
Pribor i hemikalije
epruveta
čaša
avan sa tučkom
izvor toplote
jabuka
rastvori Feling I i II
Postupak rada
U avanu sa tučkom isitniti krišku jabuke i iscediti malo soka u
epruvetu. Dodati po 1 cm3 rastvora Feling I i II, a potom sadržaj epruvete
zagrevati na vodenom kupatilu do promene boje. Zabeležiti zapažanja.
Zaključak
Ogled br.5: Hidroliza saharoze
Pribor i hemikalije
epruveta
čaša
izvor toplote
rastvor saharoze
rastvori Feling I i II
razblažena sumporna kiselina, H2SO4
čvrst natrijum hidrokarbonat, NaHCO3
Postupak rada
Sipati u epruvetu 3 cm3 rastvora saharoze i 1 cm 3 razblažene H2SO4.
Sadržaj epruvete zagrevati na vodenom kupatilu 15 minuta. Nakon toga
sadržaju dodati čvrst NaHCO3 i po 1 cm3 rastvora Feling I i II, a potom sadržaj
epruvete zagrevati na vodenom kupatilu do promene boje. Zabeležiti
zapažanja.
HPTŠ “Uroš Predić”, Zrenjanin
10
Biohemija vežbe
Zaključak
Ogled br.6: Dokazivanje skroba u krompiru i hlebu
Pribor i hemikalije
krompir
komadid hleba
rastvor joda u kalijum jodidu, I2/KI
Postupak rada
Rasedi krompir i sipati nekoliko kapi rastvora joda. Isto to uraditi i na
komadidu hleba. Zabeležiti zapažanja.
Zaključak
Ogled br.7: Hidroliza skroba pomodu kiselina
Pribor i hemikalije
epruvete
čaša
izvor toplote
rastvor skroba
rastvor konc. sumporne kiseline, H2SO4
rastvor joda u kalijum jodidu, I2/KI
razblaženi rastvor NaOH
rastvori Feling I i II
HPTŠ “Uroš Predić”, Zrenjanin
11
Biohemija vežbe
Postupak rada
U čašu sipati 25 cm3 rastvora skroba i 2 cm3 H2SO4. Dobijeni rastvor
podeliti na pet jednakih delova u pet epruveta. Svih 5 epruveta zagrevati na
vodenom kupatilu i u određenom vremenskom intervalu izvaditi po jednu
epruvetu i ispitivati Feling rastvorom, a potom i rastvorom joda. Zabeležiti
zapažanja i popuniti tabelu.
Zaključak
Vreme
2 min
5 min
8 min
12 min
20 min
HPTŠ “Uroš Predić”, Zrenjanin
boja rastvora
skrob
I2/KI
12
Biohemija vežbe
Vežba 4
BOJENE I TALOŽNE REAKCIJE PROTEINA
Ogled br.1: Biuretska reakcija
Pribor i hemikalije
epruveta
rastvor belanceta
1% rastvor bakar sulfata, CuSO4
10% rastvor NaOH
Postupak rada
Sipati u epruvetu 2 cm3 rastvora belanceta i dodati 2 cm3 rastvora
NaOH i nekoliko kapi rastvora CuSO4. Zabeležiti zapažanja.
Zaključak
Ogled br.2: Ksantoproteinska reakcija
Pribor i hemikalije
epruveta
rastvor belanceta
konc. azotna kiselina, HNO3
amonijum hidroksid, NH4OH
Postupak rada
Sipati u epruvetu 2 cm3 rastvora belanceta i dodati 2 cm3 rastvora
HNO3 i nekoliko kapi rastvora NH4OH. Sadržaj epruvete pažljivo zagrevati,
potom epruvetu ohladiti i dodati još nekoliko kapi NH4OH. Zabeležiti
zapažanja.
Zaključak
HPTŠ “Uroš Predić”, Zrenjanin
13
Biohemija vežbe
Ogled br.3: Taloženje proteina zagrevanjem
Pribor i hemikalije
epruveta
izvor toplote
rastvor belanceta
Postupak rada
Sipati u epruvetu 2 cm3 rastvora belanceta i sadržaj epruvete
zagrevati plamenikom. Zabeležiti zapažanja.
Zaključak
Ogled br.4: Taloženje proteina pomodu natrijum sulfata
Pribor i hemikalije
epruveta
rastvor belanceta
čvrst natrijum sulfat, Na2SO4
destilovana voda
Postupak rada
Sipati u epruvetu 2 cm3 rastvora belanceta i na vrh kašikice Na2SO4.
Sadržaj epruvete dobro promudkati, a potom dodati malo destilovane vode.
Zabeležiti zapažanja.
Zaključak
HPTŠ “Uroš Predić”, Zrenjanin
14
Biohemija vežbe
Ogled br.5: Taloženje proteina pomodu konc. azotne kiseline
Pribor i hemikalije
epruveta
rastvor belanceta
konc. azotna kiselina, HNO3
Postupak rada
Sipati u epruvetu 2 cm3 rastvora belanceta. Epruvetu postaviti koso,
pa pažljivo niz zid epruvete pipetom dodati nekoliko kapi HNO3 (vodedi
računa da se slojevi ne izmešaju). Zabeležiti zapažanja.
Zaključak
Ogled br.6: Taloženje proteina solima teških metala
Pribor i hemikalije
epruvete
rastvor belanceta
rastvor olovo acetata, Pb(CH3COO)2
rastvor bakar sulfata, CuSO4
rastvor živa(II)hlorida, HgCl2
destilovana voda
Postupak rada
U tri epruvete sipati po 2 cm3 rastvora belanceta. Dodati potom u
prvu nekoliko kapi (CH3COO)2, u drugu CuSO4 i u tredu HgCl2. Epruvete
promudkati i zabeležiti zapažanja. Dodati destilovane vode i
zabeležiti zapažanja.
Zaključak
HPTŠ “Uroš Predić”, Zrenjanin
15
Biohemija vežbe
Ogled br.7: Taloženje proteina alkoholom
Pribor i hemikalije
epruveta
rastvor belanceta
etanol 96%
čvrst natrijum hlorid, NaCl
Postupak rada
Sipati u epruvetu 2 cm3 rastvora belanceta i 5 cm3 etanola. Sadržaj
epruvete promudkati, a zatim dodati na vrh kašikice čvrstog NaCl i ponovo
promudkati. Zabeležiti zapažanja.
Zaključak
Ogled br.8: Dokazivanje sumpora u belančevinama
Pribor i hemikalije
epruveta
rastvor belanceta
konc. rastvor NaOH (33%)
rastvor olovo acetata, Pb(CH3COO)2
Postupak rada
Sipati u epruvetu 2 cm3 rastvora belanceta, 2 cm3 NaOH i nekoliko
kapi olovo acetata. Sadržaj epruvete promudkati, a zatim zagrevati
plamenikom nekoliko minuta. Zabeležiti zapažanja.
Zaključak
HPTŠ “Uroš Predić”, Zrenjanin
16
Biohemija vežbe
Vežba 5
ODREĐIVANJE IZOELEKTRIČNE TAČKE KAZEINA
Kazein je glavni protein mleka iz grupe fosfoproteina, prisutan je u
koncentraciji od 35 g/l. Za proteine je karakteristično da pokazuju minimalnu
rastvorljivost na svojoj izoelektričnoj tački. Ova osobina se koristi pri izolaciji
proteina.
Izolovanje kazeina iz mleka
U erlenmajer sipati 100 cm3 mleka, zatim, zagrevati do 40oC, dodati uz
mešanje 100 cm3 acetatnog pufera (smeša sirdetne kiseline i natrijum acetata).
Smešu potom ohladiti do sobne temperature i procediti je kroz gazu. Talog ispirati
nekoliko puta destilovanom vodom, a zatim sa 30 cm 3 etanola. Talog ponovo filtrirati
i ispirati sa mešavinom jednakih delova etanola i etra i na kraju sa 50 cm 3 etra.
Dobijeni talog osušiti na vazduhu.
Određivanje izoelektrične tačke kazeina
Pribor i hemikalije
0.1M rastvor sirdetne kiseline, CH3COOH
0.1M rastvor natrijum acetata, CH3COONa
bromkrezol zeleno (indikator)
rastvor kazeina
Pripremanje rastvora kazeina
Odmeriti 0.2g kazeina i preneti u normalni sud od 50 cm 3, dodati 5 cm3 rastvora
CH3COONa i oko 10 cm3 destilovane vode. Smešu zagrevati na temperaturi od 40 do
50oC na vodenom kupatilu. Nakon toga, smešu ohladiti i dopuniti do 50 cm3
destilovanom vodom.
Postupak rada
Uzeti 5 epruveta i prema datoj šemi pripremiti rastvore slededih pH vrednosti:
Epruveta
V(CH3COOH)
cm3
V(CH3COONa)
cm3
V kazeina
cm3
pH
vrednost
1
9
0
1
3.8
2
7
2
1
4.4
3
5
4
1
4.7
4
3
6
1
5.1
5
1
8
1
5.7
HPTŠ “Uroš Predić”, Zrenjanin
Biohemija vežbe
17
Posle dodatka kazeina svaku epruvetu promudkati i ostaviti da stoji 5 minuta.
Zabeležiti u kojim epruvetama je došlo do zamudenja i stvaranja taloga. Dodati
potom, u sve epruvete 2 do 3 kapi indikatora i dobijene boje uporediti sa pH skalom.
Zaključak
HPTŠ “Uroš Predić”, Zrenjanin
Download

Biohemija PT – vezbe Vanredni 2009