α -Amyláza
CNP-G3
Jednosložková souprava, kapalné činidlo ke stanovení α-Amylázy v lidském séru, plazmě.
REF
397759
Cont
5x 50 ml
Parametry měření
kinetické měření, nárůst
absorbance, CNP-G3
Vlnová délka: 405 nm
Vzorek:
sérum, heparinová plazma
Teplota:
37 °C
Linearita:
do 33 µkat/l
Limit detekce: 0,033 µkat/l
Metoda:
Princip
10 CNP-G3
α -amyláza
------------> 9 CNP + 1 CNP-G2 + G3+G
Jako substrát je použit 2-chlor-4-nitrofenyl-α-maltotri-osid (CNP-G3), který je během inkubace přímo
hydrolyzován účinkem α-amylázy ze vzorku. Vznikající 2-chlor-4-nitrofenol je měřen při 405 nm a jeho
intenzita je přímo úměrná katalytické koncentraci α-amylázy ve vzorku.
Použité zkratky:
CNP
2-chlor-4-nitrofenol
CNP-G2
2-chlor-4-nitrofenyl-α-maltosid
MES
Kyselina 2-(N-morfolino) etan
sulfonová
Složení a koncentrace činidel
SLOŽENÍ
MES pufr, pH 6,00
NaCl
Octan vápenatý
Thiokyanatan draselný
CNP-G3
Stabilizátory, detergenty
KONCENTRACE
100 mmol/l
350 mmol/l
6 mmol/l
900 mmol/l
2,27 mmol/l
< 0,1%
Příprava činidla
Činidlo je připraveno k přímému použití.
Stabilita a skladování činidla
Činidlo skladujeme při teplotě 2-8°C. Souprava je stabilní po celou dobu exspirace, vyznačené na obalu.
Po otevření je činidlo stabilní 60 dní. Po použití činidlo okamžitě uzavřete. Činidlo chraňte před světlem a
teplem! Mírná změna žlutého zabarvení neovlivňuje test. K stanovení nelze použít činidlo, jehož
_________________________________________________________________________________________________________________________
Rev. 04-201404
Strana 1 z 4
absorbance je vyšší než 0,50 (měřeno při 405 nm proti destilované vodě v 1 cm kyvetě). Nedodržení
uvedených doporučení zbavuje firmu DIALAB jakékoliv zodpovědnosti.
Vzorek
K stanovení doporučujeme použít sérum, v případě použití plasmy lze použít pouze heparinát amonný,
případně lithný. K vyšetření použijeme pouze čiré sérum bez hemolýzy.
Sérum nebo plazma jsou stabilní:
při 15-25°C
7 dní
při 2-8°C
7 dní
při -20°C
1 rok
Nezamrazujte opakovaně. Nepoužívejte kontaminované vzorky.
Odběr doporučujeme provést do zkumavky:
"VACUETTE" pro sérum (červené).
Interferující látky
Nedochází k interferenci, pokud je koncentrace nižší než:
kyselina askorbová
50 mgl/dl
bilirubin
855 mol/l
hemoglobin
5
g/l
triacylglyceroly
33,8 mmol/l
Provedení testu
Činidla a vzorky preinkubujeme na laboratorní teplotu.
V séru nebo plazmě:
Pipetujeme:
činidlo
dest. voda/fyzi. roztok
vzorek
1,00 ml
0,025 ml
0,025 ml
Promícháme, inkubujeme 1 minutu při 37°C. Měříme absorbance přesně po 1, 2 a 3 minutách. Z lineární
části křivky stanovíme ΔA/min. ΔA/min vzorku - ΔA/min blanku = ΔA/min
Kalkulace
ΔA/min x faktor = µkat/l α-amylázy
Hodnota faktoru:
Vzorek
Faktor
Sérum, plazma
52,97
Pro výpočet katalytické koncentrace α-amylázy získané výsledky násobíme příslušným faktorem.
Referenční rozmezí*
v µkat/l
sérum/plazma
37 °C
0,38- 1,47
* Doporučujeme každé laboratoři stanovit si vlastní referenční rozmezí.
Analytické parametry stanovení
Linearita
Metoda je lineární do 33 µkat/l. Při vyšší katalytické koncentraci α-amylázy vyšetření opakujeme se
vzorkem ředěným 1+9 roztokem NaCl o koncentraci 0,154 mol/l. Změřený výsledek násobíme faktorem
10.
_________________________________________________________________________________________________________________________
Rev. 04-201404
Strana 2 z 4
Přesnost
Intraassay
n = 10
Vzorek 1
Vzorek 2
Vzorek 3
Vzorek 4
Průměr
[µkat/l]
SD
[µkat/l]
CV
[%]
1,017
4,53
15,04
25,16
0,014
0,028
0,077
0,156
1,34
0,61
0,51
0,62
Interassay
n = 10
Vzorek 1
Vzorek 2
Vzorek 3
Vzorek 4
Průměr
[µkat/l]
SD
[µkat/l]
CV
[%]
1,030
4,55
15,29
25,12
0,017
0,037
0,138
0,150
1,7
0,8
0,9
0,6
Porovnání metod
Při porovnání Dialab α-amylázy (y) s komerčně dostupným testem (x) (50 vzorků; 0,047-5,07 µkat/l )byly získány
následující výsledky:
y=0.90x+0,04 µkat/l; r=0.999.
Kontrola kvality
Doporučujeme používat všechna komerční kontrolní séra, kde je uvedena hodnota pro tuto metodu
stanovení.
Doporučujeme používat:
REF
DIACON N
D98481
DIACON P
D98482
Kalibrace
Doporučujeme použít vhodný komerční kalibrátor pro automatické systémy, kde je uvedena hodnota pro
tuto metodu stanovení α-amylázy.
Doporučujeme používat:
REF
DIACAL AUTO
D98485
Automatizace
Na požádání jsou k disposici aplikační listy pro běžné typy automatických analyzátorů.
Bezpečnostní upozornění
1.
2.
3.
4.
5.
6.
Pouze pro in-vitro diagnostické použití
Dodržujte správnou laboratorní praxi.
Pozor na kontaminaci činidla slinnou α-amylázou. Nepipetujte ústy. Zamezte kontaktu činidla
s pokožkou. (Sliny a pot obsahují α-amylázu!)
Xn: zdravý škodlivý
R22: Zdraví škodlivý při požití
S2: Uchovávejte mimo dosah dětí
S13: Uchovávejte odděleně od potravin, nápojů a krmiv
S36/37: Používejte vhodný ochranný oděv a ochranné rukavice
S46: Při požití okamžitě vyhledejte lékařskou pomoc a ukažte tento obal nebo označení
Upozornění: obsahuje thiokyanatan draselný. Není kompatibilní se silnými kyselinami.
Upozornění: obsahuje azid sodný, který může reagovat s olovnatým nebo měděným potrubím za
vzniku výbušných sloučenin azidu. V případě úniku do potrubí propláchněte velkým množstvím
vody.
_________________________________________________________________________________________________________________________
Rev. 04-201404
Strana 3 z 4
Odpadové hospodářství
Prázdný obal zneškodněte v rámci tříděného odpadu v souladu se zákonem o odpadech.
Literatura
1. Ranson, JHC, Curr, Prob. Surg., 16:1 (1979).
2. Salt, WB II and Schenker, S., Medicine, 55:269 (1976).
3. Stefanini, P., Ermini, M., and Carboni, M., J.Am.Surg., 119:866 (1965).
4. Henry, RJ, and Chiamori, N., Clin Chem., 6:434 (1960).
5. Kaufman, RA and Tietz, NW, Clin Chem., 26:846 (1980).
6. Blair, HE, U.S. Patent No. 4,649,108.
7. Chavez, RG, et al, U.S. Patent 4,963,479.
8. NCCLS document “Procedures for the Collection of Diagnostic Blood Specimens by Skin Puncture”, 3rd
Ed., 11:11 (1991).
9. Demetriou, J., et al, “Clinical Chemistry: Principles and Techniques”, 2nd Ed., Harper & Row (1974).
10. Suelter, CH, “A Practical Guide To Enzymology”, Wiley & Sons (1985).
11. Rosenblum, JL, et al, Clin Chem., 38 :9 (1992).
12. Tietz, NW ; “Clinical Guide to Laboratory Tests”; W.B. Saunders Co., 54(1983)
13. NCCLS document “Evaluation of Precision Performance of Clinical Chemistry Devices”, 2nd Ed., 12:4
(1992).
14. 14 Young, DS, “Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests”, 4th Ed.,AACC Press, Washington DC;
3-43 to 3-47 (1995).
15. IFCC document “The Theory of Reference Values”, Stage 2, draft 2 J. Clin. Biohcem., 21:749 (1983).
Skladujte při 2-8 °C, nezamrazujte.
Určeno pro "in vitro" diagnostické použití.
DIALAB spol. s r.o.
Nám. Osvoboditelů 1, 153 80 Praha 5
Tel./Fax:257 910 255
257 910 260
257 910 263
e-mail: [email protected]
IČO: 14889200
_________________________________________________________________________________________________________________________
Rev. 04-201404
Strana 4 z 4
Download

Příbalový leták - Dialab spol.s r.o.